今日上午，我司錢收到來自上海交通大學(xué)一位學(xué)生的，咨詢到ELISA試劑盒實驗流程中要重點注意哪些地方？我司將此問的解析整理如下：

各種類型測定時一般需經(jīng)過以下步驟：
    固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。ELISA操作較繁雜，操作不當(dāng)將引起較大的誤差。
實驗流程中需要重點注意的地方：
    1、隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響，某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動，因此有必要對標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理。
    2、在成批手工檢測中，還應(yīng)注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時間不一致，對競爭法及定量檢測影響很大，不注意可能會導(dǎo)致錯誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
    3、洗滌可用洗板機洗板或手工洗板，前者洗滌質(zhì)量較好，各反應(yīng)孔洗滌效果均一，批內(nèi)、批間差異小，手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果，差異不宜太大。
    4、準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用測讀儀（酶標(biāo)儀），比色法判讀可選擇單波長或雙波長，根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片，以空白孔校零測定反應(yīng)孔的吸光度值（A值）。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。
             

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