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日期:2026-01-14瀏覽:14次
一、血清的收集與處理
采集方法
血清是通過(guò)靜脈采血獲得的,采血后血液在無(wú)抗凝劑條件下自然凝固,析出的淡黃色液體即為血清。采血時(shí)需使用無(wú)菌技術(shù),避免溶血,因?yàn)槿苎獣?huì)釋放具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),導(dǎo)致ELISA等檢測(cè)方法出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng),影響結(jié)果準(zhǔn)確性。
處理流程
凝固與離心:采血后,血液在室溫下靜置30分鐘至1小時(shí),待完-全凝固。隨后以2500-3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5-10分鐘,分離血細(xì)胞與血清。
保存條件:血清應(yīng)分裝保存于-20°C或-80°C,避免反復(fù)凍融。短期保存可置于4°C,但不宜超過(guò)24小時(shí)。保存過(guò)程中若出現(xiàn)沉淀,使用前需再次離心。
注意事項(xiàng)
避免37°C長(zhǎng)時(shí)間放置,以防血清混濁和成分降解。
熱滅活可能導(dǎo)致沉淀增多,若非必要,不建議進(jìn)行此步驟。
二、血漿的收集與處理
采集方法
血漿通過(guò)靜脈采血獲得,采血時(shí)需使用抗凝劑(如EDTA、肝素鈉或枸櫞酸鈉)以防止血液凝固。采血后30分鐘內(nèi),需輕柔混合樣本10-20次,確??鼓齽┚鶆蚍植?。
處理流程
離心分離:混合后的血液在2-8°C條件下以5000-6000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,分離血漿與血細(xì)胞。
保存條件:血漿應(yīng)分裝保存于-20°C或-80°C,避免反復(fù)凍融。保存過(guò)程中若有沉淀形成,使用前需再次離心。
注意事項(xiàng)
避免溶血或高血脂樣本,以防檢測(cè)干擾。
使用前需檢查ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū),確認(rèn)抗凝劑兼容性。
三、尿液的收集與處理
采集方法
尿液樣本可通過(guò)自然排尿收集,常用方法包括晨尿、隨機(jī)尿或計(jì)時(shí)尿(如24小時(shí)尿)。采集時(shí)使用無(wú)菌容器,避免陰道分泌物、精液或糞便污染。
處理流程
離心分離:尿液在2-8°C條件下以5000-6000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,分離上清液。
保存條件:上清液可保存于4°C(1-2天)或-20°C(1個(gè)月)。長(zhǎng)期保存需分裝,避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
尿液易受細(xì)菌污染,需立即冷藏或添加防腐劑(如甲苯)以防細(xì)菌繁殖和尿素分解。
計(jì)時(shí)尿需記錄總尿量和體積,以計(jì)算藥物排泄總量。
四、唾液的收集與處理
采集方法
唾液樣本可通過(guò)自然分泌或刺激分泌(如咀嚼無(wú)糖口香糖)收集。采集前1小時(shí)需禁食,并用清水或生理鹽水漱口以減少食物殘?jiān)蓴_。
處理流程
離心分離:唾液在2-8°C條件下以5000-6000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,分離上清液。
保存條件:上清液可保存于4°C(短期)或-20°C(長(zhǎng)期)。保存過(guò)程中若有沉淀形成,使用前需再次離心。
注意事項(xiàng)
唾液采集無(wú)-創(chuàng)且方便,適合兒童或頻繁采樣場(chǎng)景。
唾液pH和分泌量受飲食和情緒影響,需標(biāo)準(zhǔn)化采集條件。
五、細(xì)胞的收集與處理
采集方法
細(xì)胞樣本可通過(guò)組織活檢、血液分離或細(xì)胞培養(yǎng)獲得。血液樣本需使用抗凝劑(如肝素),組織樣本需在無(wú)菌條件下切取。
處理流程
分離與培養(yǎng):血液樣本經(jīng)離心分離血細(xì)胞后,可進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)上清液需在2-8°C條件下以5000-6000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,分離上清液。
保存條件:細(xì)胞可保存于液氮(長(zhǎng)期)或-80°C(短期)。保存過(guò)程中需避免反復(fù)凍融,以防細(xì)胞損傷。
注意事項(xiàng)
細(xì)胞樣本易受污染,需嚴(yán)格無(wú)菌操作。
培養(yǎng)上清液需及時(shí)處理,以防分泌性成分降解。
六、總結(jié)與建議
標(biāo)準(zhǔn)化操作:所有樣本采集需遵循標(biāo)準(zhǔn)化流程,確保數(shù)據(jù)可比性。
質(zhì)量控制:定期驗(yàn)證樣本處理方法的準(zhǔn)確性,如通過(guò)質(zhì)控樣本檢測(cè)。
倫理與安全:涉及人體樣本時(shí),需遵守倫理審查和知情同意原則。
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