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2020-07-15
1.血清使用時一定需要滅活么？實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或*沒有任何作用，甚至因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴增。若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間，更確...2020-07-08
目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。DNA合成儀有很多種,主要都是由ABI/PE公司生產(chǎn)，而Bioneer自行研制的384并行高通量DNA合成儀，可實現(xiàn)99%的高合成率。無論采用什么機器合成，合成的原理都相同，主要差別在于合成產(chǎn)率的高低，試劑消耗量的不同和單個循環(huán)用時的多少。亞磷酰胺三酯法合成DNA段，具有高效、快速的偶聯(lián)以及起始反應(yīng)物比較穩(wěn)定的特點。亞磷酰胺三酯法是將DNA固定在固相載體上完成DNA鏈的合成的，合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的，相鄰的核苷酸...2020-07-01
把細(xì)胞養(yǎng)好的三個關(guān)鍵要素是：良好的細(xì)胞來源，正確的實驗操作，以及合適的培養(yǎng)體系。其中“合適的培養(yǎng)體系”就是要創(chuàng)造適合細(xì)胞生長的環(huán)境，給細(xì)胞建立一個滿意的“家”。細(xì)胞培養(yǎng)基本條件：1.合適的細(xì)胞培養(yǎng)基合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長增殖的重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生長增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。2.優(yōu)質(zhì)血清目前，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中重要的成分之一，含有細(xì)胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yǎng)成分。3.無菌...2020-06-10
顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，在電解質(zhì)參與下所形成的肉眼可見的凝集現(xiàn)象，稱為凝集反應(yīng)。其中的抗原稱為凝集原，抗體稱為凝集素。在該反應(yīng)中，因為單位體積抗體量大，做定量實驗時，應(yīng)稀釋抗體。1.直接凝集反應(yīng)玻片凝集法：是一種常規(guī)的定性試驗方法。原理是用已知抗體來檢測未知抗原。常用于鑒定菌種、血型。如將含有痢疾桿菌抗體的血清與待檢菌液各一滴，在玻片上混勻，數(shù)分種后若出現(xiàn)肉眼可見的凝集塊，即陽性反應(yīng)，證明該菌是痢疾桿菌。此法快速、簡便，但不能進(jìn)行定量測定。試管凝集法：是一種定量試驗方法。多...2020-05-21
胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。如何擇取胎牛血清的質(zhì)量：1、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml。內(nèi)毒素是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分，因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前，國產(chǎn)血清基本都能達(dá)到這一要求，很多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高，只要求不高于50EU/ml，高出我國標(biāo)準(zhǔn)10倍?？梢?，內(nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量，除非含...2020-05-19
ELISA試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年，假設(shè)保存妥當(dāng)?shù)脑?，不會出現(xiàn)疑問的。但不要重復(fù)凍融。當(dāng)然假設(shè)是正常的DAS-ELISA查看試劑盒等，應(yīng)當(dāng)放在4℃支配冰箱保存。建議ELISA試劑盒凍結(jié)后一次用完。已開封或許運用后，剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，ELISA查看試劑盒開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免濕潤。但要留意的是，假設(shè)將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來就當(dāng)即運用的話，也許會影響，其直接的效果是對一些弱陽性標(biāo)本的查看出現(xiàn)假陰性。建議：先從冰箱...2020-05-13
ELISA試劑盒價格加樣時的防錯小經(jīng)驗(1)用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報紙，墊在下面，這樣，加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會變小，沒加的字正常，非常容易區(qū)分。(2)可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別(3)在標(biāo)本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，也可以加以區(qū)分ELISA試劑盒試驗的操作方法:(1)將抗原按一定的梯度倍比稀釋后，按照ELISA從上到下(或者從左到右)的順序包被。(2)將抗體按一定的梯度倍比稀釋后按照ELISA從左到右或者從上到下加入。(3)二抗的...